与严重急性呼吸综合征（SARS）冠状病毒类似，2019 nCoV属于B系β-冠状病毒，具有利用人血管紧张素转换酶2（ACE2）作为受体感染人类细胞的能力。3 SARS冠状病毒（S）蛋白S2亚基在介导病毒与宿主细胞融合和进入宿主细胞中起关键作用，其中七烷重复序列1（HR1）和七烷重复序列2（HR2）可以相互作用形成六个螺旋束（6-HB），从而使病毒和细胞膜接近融合。以S-HR1为靶点，我们以前设计并开发了几种有效的抗SARS-CoV（如SARS-HR2P）4和中东呼吸综合征（MERS-HR2P）CoV（如MERS-HR2P）5，但2019-nCoV是否也具有与SARS-CoV和MERS-CoV相似的融合和进入机制，如果是，是否也不清楚2019-nCoV S-HR1也可以作为2019-nCoV融合/进入抑制剂开发的重要目标。

研究结果首次证实了2019 nCoV HR1和HR2区域能够相互作用形成6-HB，并表明2019-nCoV-HR2P可能会抑制2019 nCoV与靶细胞融合并进入靶细胞，正如我们之前对SARS-CoV、MERS-CoV和其他人类CoV所展示的一样。4,5,8证实了这一假设，我们在此开发了一种2019-nCoV S介导的细胞-细胞融合试验。4,5,8使用该分析，我们证明2019-nCoV-HR2P表现出强大的融合抑制活性，半最大抑制浓度（IC50）为0.18µM（图1g），表明2019-nCoV HR1区域可以作为理想的目标位置。另一方面，2019-nCoV-HR1P在高达40μM的浓度下没有表现出明显的抑制作用，这与其他冠状病毒HR1衍生肽（如SARS-HR1P和MERS-HR1P）一致。

我们之前报道过各种冠状病毒中的HR1区域是一个保守的靶位点，基于这个证据，我们设计了一种泛冠状病毒融合抑制剂，表示为EK1.8，与2019-nCoV-HR2P相比，EK1表现出显著的序列变异，但有趣的是，EK1也可以以类似的方式结合2019-nCoV-HR1P至2019-nCoV-HR2P（图1h）。2019-nCoV-HR1P/EK1复合物也显示出高螺旋度（77.9%）（图1i）。EK1还表现出与0.19μM的IC50的有效融合抑制活性（图1g）。综上所述，这些结果表明2019-nCoV S-HR1区域也是开发有效CoV融合/进入抑制剂的一个有希望的保守靶点。

进一步，我们评估了2019-nCoV-HR2P或EK1对表达ACE2的293T细胞中2019-nCoV-HR2P或EK1的抑制作用。如图1j所示，2019-nCoV-HR2P和EK1肽均能以剂量依赖方式显著抑制2019-nCoV假病毒感染，IC50值分别为0.98和2.38μM。

因此，我们共同确认2019-nCoV S-HR1和S-HR2在介导2019-nCoV与宿主细胞融合和进入宿主细胞中起关键作用。2019-nCoV可能具有与SARS-CoV相似的膜融合机制。当S1蛋白在人细胞上识别其受体时，HR1和HR2结构域相互作用，形成6-HB介导病毒与靶细胞的膜融合（图1k）。值得注意的是，2019-nCoV-HR2P和EK1（pan-CoV融合抑制剂）对S介导的细胞-细胞融合和2019-nCoV假病毒感染均表现出强大的抑制活性，表明2019-nCoV-HR2P或EK1肽在鼻喷雾剂和吸入制剂中的潜在发展，防治2019-nCoV感染。

翻译自Shuai Xia, Yun Zhu, Meiqin Liu, Qiaoshuai Lan, Wei Xu, Yanling Wu, Tianlei Ying, Shuwen Liu, Zhengli Shi, Shibo Jiang & Lu Lu . Fusion mechanism of 2019-nCoV and fusion inhibitors targeting HR1 domain in spike protein. Cellular & Molecular Immunology  17, 765–767(2020)。

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